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液相色譜儀常見問題解答

 更新時間:2019-01-25 點擊量:1729

HPLC常見問題的解答

  一、問:用HPLC進(jìn)行分析時保留時間有時發(fā)生漂移,有時發(fā)生快速變化,原因何在?如何解決?

  答:關(guān)于漂移問題:

  1. 溫度控制不好,解決方法是采用恒溫裝置,保持柱溫恒定

  2. 流動相發(fā)生變化,解決辦法是防止流動相發(fā)生蒸發(fā)、反應(yīng)等

  3. 柱子未平衡好,需對柱子進(jìn)行更長時間的平衡

  關(guān)于快速變化問題

  1. 流速發(fā)生變化,解決辦法是重新設(shè)定流速,使之保持穩(wěn)定

  2. 泵中有氣泡,可通過排氣等操作將氣泡趕出。

  3. 流動相不合適,解決辦法為改換流動相或使流動相在控制室內(nèi)進(jìn)行適當(dāng)混合

  二、問:液相色譜中峰出現(xiàn)拖尾或出現(xiàn)雙峰的原因是什么?</B>

  答: 1. 篩板堵塞或柱失效,解決辦法是反向沖洗柱子,替換篩板或更換柱子。

  2. 存在干擾峰,解決辦法為使用較長的柱子,改換流動相或更換選擇性好的柱子

  三、問:HPLC靈敏度不夠的主要原因及解決辦法</B>

  答: 1. 樣品量不足,解決辦法為增加樣品量

  2. 樣品未從柱子中流出。可根據(jù)樣品的化學(xué)性質(zhì)改變流動相或柱子

  3. 樣品與檢測器不匹配。根據(jù)樣品化學(xué)性質(zhì)調(diào)整波長或改換檢測器

  4. 檢測器衰減太多。調(diào)整衰減即可。

  5. 檢測器時間常數(shù)太大。解決辦法為降低時間參數(shù)

  6. 檢測器池窗污染。解決辦法為清洗池窗。

  7. 檢測池中有氣泡。解決辦法為排氣。

  8. 記錄儀測壓范圍不當(dāng)。調(diào)整電壓范圍即可。

  9. 流動相流量不合適。調(diào)整流速即可。

  10. 檢測器與記錄儀超出校正曲線。解決辦法為檢查記錄儀與檢測器,重作校正曲線。

  四、問:做HPLC分析時,柱壓不穩(wěn)定,原因何在?如何解決?</B>

  答:原因可能有:

  1. 泵內(nèi)有空氣,解決的辦法是清除泵內(nèi)空氣,對溶劑進(jìn)行脫氣處理;

  2. 比例閥失效,更換比例閥即可;

  3. 泵密封墊損壞,更換密封墊即可;

  4. 溶劑中的氣泡,解決的辦法是對溶劑脫氣,必要時改變脫氣方法;

  5. 系統(tǒng)檢漏,找出漏點,密封即可;

  6. 梯度洗脫,這時壓力波動是正常的。

  五、問:我購買的HPLC柱驗收測試時柱壓過高,請問為什么?</B>

  答:柱壓過高是HPLC柱用戶常碰到的問題。其原因有多方面,而且常常并不是柱子本身的問題,您可按下面步驟檢查問題的起因。

  1. 拆去保護(hù)預(yù)柱,看柱壓是否還高,否則是保護(hù)柱的問題,若柱壓仍高,再檢查;

  2. 把色譜柱從儀器上取下,看壓力是否下降,否則是管路堵塞,需清洗,若壓力下降,再檢查;

  3. 將柱子的進(jìn)出口反過來接在儀器上,用10倍柱體積的流動相沖洗柱子,(此時不要連接檢測器,以防固體顆粒進(jìn)入流動池)。這時,如果柱壓仍不下降,再檢查;

  4. 更換柱子入口篩板,若柱壓下降,說明您的溶劑或樣品含有顆粒雜質(zhì),正是這些雜質(zhì)將篩板堵塞引起壓力上升。若柱壓還高,請與廠商聯(lián)系。 一般情況下,在進(jìn)樣器與保護(hù)柱之間接一個在線過濾器便可避免柱壓過高的問題

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